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正確操作96孔PCR板封膜的步驟
像科研實(shí)驗(yàn)人員都有“貼膜"的經(jīng)歷,也就是給96孔PCR板封膜。確保封板膜與96孔板親密貼合,防止液體蒸發(fā),才能保障實(shí)驗(yàn)順利。本生技術(shù)小編來(lái)分享一下,如何正確的封膜。
自粘性封板膜的使用方法和注意事項(xiàng):(也適用于鋁箔膜)
一、將封板膜貼在板子上
從自封袋中取出單張封板膜,然后重新封好自封袋,以保持其中的無(wú)酶環(huán)境。保持底襯面朝上,握住封板膜,沿著切線處慢慢撕下底襯。然后將封板膜粘性面的一端貼在板子上,掌握好距離和角度,避免后續(xù)貼歪。貼的過(guò)程中一端貼,另一端拉住。
注意:一定要戴手套。如果使用單端標(biāo)簽的封板膜,則將襯紙部分除去,然后將封板膜錨固到板上,使其密封在整個(gè)板上,然后繼續(xù)除去襯紙。這種方法可以消除封板膜產(chǎn)生的卷曲和回滾。
如果使用兩個(gè)末端標(biāo)簽的96孔PCR板,請(qǐng)以連續(xù)平滑的方式剝離中心襯紙。緩慢剝離內(nèi)襯可以減少卷曲。不要接觸薄膜的粘合表面。
二、壓膜
使用壓膜板緩慢刮壓封板膜,使其全部密封到板上。假如沒(méi)有用的壓膜板,可以找一個(gè)邊緣光滑的卡。壓膜步驟應(yīng)至少水平和垂直執(zhí)行兩次。施加足夠的力(也別太大力)對(duì)于獲得良好的密封性至關(guān)重要。
將壓膜板沿著96孔PCR板的所有外邊緣刮壓至少兩次,確保施加堅(jiān)定而持續(xù)的壓力。孔間和邊緣要都要壓一遍。為了好結(jié)果,要耐心圖片。將封板膜正確密封到板上之后,沿切線撕下接頭部分。
注意:壓膜的時(shí)候,另一只手要穩(wěn)住板子,避免板子劇烈晃動(dòng)。
三、檢查
密封后仔細(xì)檢查平板,確認(rèn)薄膜與板之間是否緊密貼牢。確認(rèn)每個(gè)孔周?chē)恼迟N痕跡,平板的整個(gè)表面(包括周邊)都被密封,以及膜上是否有液體。封板膜不應(yīng)出現(xiàn)褶皺,如果觀察到皺紋,則說(shuō)明板未正確密封。
注意:對(duì)于邊緣凸起的平板,封板膜在板上定位可能不正確,要避免膜向上延伸到96孔PCR板的側(cè)壁上;在開(kāi)始PCR實(shí)驗(yàn)之將密封的平板放置至少10分鐘,封板膜的粘合力將隨著時(shí)間增加。有條件話,使用孔板用離心機(jī)離心。
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